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外泌體可通過(guò)流式、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）、電鏡觀察、NTA粒徑追蹤等手段檢測(cè)，普遍應(yīng)用于藥物載體、疾病診斷marker、精細(xì)醫(yī)療、一些病癥治病等方面研究。由于外泌體直徑小，樣本含量低，提取十分困難。已有的外泌體分離方式有密度梯度離心、超濾...

外泌體的提取方法：1、色譜法。色譜法是利用根據(jù)凝膠孔隙的孔徑大小與樣品分子尺寸的相對(duì)關(guān)系而對(duì)溶質(zhì)進(jìn)行分離的分析的方法。樣品中大分子不能進(jìn)入凝膠孔，只能沿多孔凝膠粒子之間的空隙通過(guò)色譜柱，首先被流動(dòng)相洗脫出來(lái)；小分子可進(jìn)入凝膠中絕大部分孔洞，在柱中受到更強(qiáng)地滯留...

RNA提?。侯A(yù)備工作（1）塑料制品：盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品，如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò)，通常不必再處理。處理的步驟如下：O在玻璃燒杯中注入去離子水，加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙...

外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì)：純化和富集的完整血漿/血清，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)基中外泌體的可用于功能研究；樣本輸入量多樣；無(wú)需耗時(shí)的超速離心，過(guò)濾或特殊注射器；無(wú)需沉淀試劑，也無(wú)需過(guò)夜培養(yǎng)；無(wú)需蛋白酶處理；適用于多種物種；外泌體被純化并且不含任何其他RNA結(jié)合蛋白；...

DNA稱脫氧核糖核酸，是一種分子，雙鏈結(jié)構(gòu)，由脫氧核糖核苷酸（成分為：脫氧核糖、磷酸及四種含氮堿基）組成?？山M成遺傳指令，引導(dǎo)生物發(fā)育與生命機(jī)能運(yùn)作。主要功能是長(zhǎng)期性的資訊儲(chǔ)存，可比喻為“藍(lán)圖”或“食譜”。RNA稱核糖核酸，是以DNA的一條鏈為模板，以堿基互補(bǔ)...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中。現(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫...

功能的區(qū)別：1、RNA的功能：mRNA是依據(jù)DNA序列轉(zhuǎn)錄而成的蛋白質(zhì)合成模板；tRNA是mRNA上遺傳密碼的識(shí)別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)者；rRNA是組成核糖體的部分，而核糖體是蛋白質(zhì)合成的機(jī)械。細(xì)胞中還有許多種類和功能不一的小型RNA，可調(diào)節(jié)基因表達(dá)。而其他如I、...

植物RNA提?。褐参锝M織中，富含酚類化合物，或富含多糖，或含有某些尚無(wú)法確定的次級(jí)代謝產(chǎn)物，或RNase的活性較高。這些物質(zhì)在細(xì)胞裂解后與RNA緊密結(jié)合形成難溶復(fù)合物或者膠狀沉淀，很難將其去除。所以我們?cè)谔崛≈参锝M織時(shí)，要選取針對(duì)植物的試劑盒，試劑盒里的裂解液...

外泌體的提取的方式：1、免疫磁珠法，這種方法可以保證外泌體形態(tài)的完整，特異性高、操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備，但是非中性pH和非生理性鹽濃度會(huì)影響外泌體生物活性，不便進(jìn)行下一步的實(shí)驗(yàn)。2、PS親和法，該方法將PS（磷脂酰絲氨酸）與磁珠結(jié)合，利用親和原理捕獲外...

RNA快速提取試劑盒：隨著對(duì)小RNA的研究的逐漸深入，小RNA的分離逐漸成為一種需求，百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力，開(kāi)發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒，對(duì)各種不同來(lái)源的樣品（動(dòng)物、植物、細(xì)胞等）均取得滿意的效果。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù)，對(duì)小...

外泌體是細(xì)胞間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸和信息交流的重要工具，可以通過(guò)調(diào)節(jié)免疫功能促進(jìn)一些病癥的增殖，血管新生和一些病癥轉(zhuǎn)移。與細(xì)菌傳染，幫助細(xì)菌逃避免疫關(guān)系很大，并與心血管疾病，老年癡呆等疾病具有密切關(guān)系。外泌體可通過(guò)流式、WB（檢測(cè)指標(biāo)有CD9,CD63,CD81）、電...

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了...

拭子RNA提取試劑的選擇？1、產(chǎn)品價(jià)格。價(jià)格也是選購(gòu)產(chǎn)品的重要考量因素。對(duì)于絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)如Northern雜交、RT-PCR、RealTimeRT-PCR、cDNA文庫(kù)構(gòu)建等，國(guó)產(chǎn)試劑盒都能滿足質(zhì)量要求。與國(guó)外有名品牌相比，國(guó)產(chǎn)試劑盒的價(jià)格較為便宜，價(jià)格還不到...

RNA快速提取試劑盒：隨著對(duì)小RNA的研究的逐漸深入，小RNA的分離逐漸成為一種需求，百泰克利用雄厚的研發(fā)實(shí)力，開(kāi)發(fā)出高效快捷的小RNA分離純化試劑盒，對(duì)各種不同來(lái)源的樣品（動(dòng)物、植物、細(xì)胞等）均取得滿意的效果。miRNA提取試劑盒采用自創(chuàng)的結(jié)合洗脫技術(shù)，對(duì)小...

RNA的提?。罕娝苤?，Trizol是一種RNA提取試劑，內(nèi)含異硫氰酸胍和酚等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞和溶解細(xì)胞中的其他成分，壓制細(xì)胞釋放出核酸酶，維持細(xì)胞中RNA的穩(wěn)定性，我們可以在反應(yīng)物中加入Trizol后搖勻，在加入氯仿離心，這樣的話我們的RNA就進(jìn)入了水相...

所含化學(xué)成分明確，無(wú)動(dòng)物源性成分，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長(zhǎng)期在-80℃冰箱保存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM（LC-1602）是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液，可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)1、省去繁瑣的降溫...

用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng)：1、選擇血清還是血漿？推薦大多數(shù)研究選擇血漿。血液凝固過(guò)程中血小板會(huì)產(chǎn)生大量外泌體，含量占血清中外泌體的50%以上，選擇血漿可避免不必要的影響。2、注意抗凝劑的選擇。肝素類抗凝劑與PCR假陰性有關(guān)，這可能是因?yàn)楦嗡嘏c引物和/或...

總RNA提取試劑是廣譜型總RNA提取試劑。實(shí)驗(yàn)操作快速方便，顏色鮮明，便于分層。本試劑適用范圍普遍，可以從動(dòng)物組織、植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。該方法對(duì)少量的組織(50-100mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1g)和細(xì)胞(>...

外泌體鑒定：外泌體分離之后，需要經(jīng)過(guò)一系列鑒定才能確定分離的是外泌體。鑒定方法從物理特征到表面分子標(biāo)志物，多角度進(jìn)行鑒定。l透射電鏡鑒定法：簡(jiǎn)稱TEM，適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察，即通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形。l納米顆粒追蹤分析法：簡(jiǎn)稱NTA，該方法能...

DNA和RNA的鑒別染色：利用吖啶橙的變色特性可鑒別DNA和RNA。吖啶橙作為一種熒光染料已被用于染色固定，非固定細(xì)胞核酸，或作溶酶體的一種標(biāo)記。觀察死亡細(xì)胞熒光變色性變化以及區(qū)別分裂細(xì)胞和靜止細(xì)胞群體。雖然測(cè)定DNA和RNA含量時(shí)較難獲得好的重復(fù)性結(jié)果，但該...

外泌體的提取方法，先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài)，不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再...

細(xì)胞凍存配制含10%DMSO或甘油的細(xì)胞凍存液，4℃預(yù)冷（新鮮配制的凍存液會(huì)產(chǎn)生大量的熱）；取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，用細(xì)胞消化酶將單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；懸浮細(xì)胞則直接將細(xì)胞收集到離心管中；離心1200rpm，6min；去除上清液，逐漸加入適量預(yù)冷的細(xì)胞凍存液，用...

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)：1、細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml－15m培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。2、復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃...

細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核RNA提取試劑盒特點(diǎn)：1.有效分離和提取細(xì)胞質(zhì)RNA，與細(xì)胞核RNA。2.方便快捷的離心柱操作方式。3.提取的RNA，品質(zhì)高，產(chǎn)量多。4.試劑盒不含苯酚，可提取所有RNA（含RNA）。5.純化的RNA可用于任何應(yīng)用，包括RT-PCR，qRT-PC...

總RNA提取試劑試劑能促進(jìn)不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如，從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色，可見(jiàn)許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分)，兩條優(yōu)勢(shì)核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S...

無(wú)血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢：很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是：新鮮的培養(yǎng)基，其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法：將冷凍管置于4℃條件喜愛(ài)10分鐘，接著在-20℃的條件下30分鐘，-80℃的條件下保存16-18個(gè)小時(shí)（或隔夜保...

外泌體的提取方法，先用含無(wú)外泌體血清的培養(yǎng)基對(duì)人脂肪來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行饑餓培養(yǎng)，這樣可使干細(xì)胞處于正常生長(zhǎng)狀態(tài)，不會(huì)被克制生長(zhǎng)增殖，其所分泌的外泌體所包含的有效物質(zhì)也更貼近其自然狀態(tài)下的外泌體，然后將含有外泌體的培養(yǎng)上清液進(jìn)行低速差速離心(即先一離心處理、再...

植物花總ＲＮＡ提取試劑盒：采用進(jìn)口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱，配合特殊的提取緩沖液，可以從多糖多酚植物的根、莖、葉以及花組織中快速提取總RNA，40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過(guò)程，提取的總RNA純度高，沒(méi)有DNA和蛋白質(zhì)污染，適用于RT-PCR、qRT-PCR...

RNA可分為：mRNA：在蛋白分子合成過(guò)程中，作為“信使”分子，將基因組DNA的遺傳信息（即堿基排列順序）傳遞至核糖體，使核糖體能夠以其堿基排列順序摻入互補(bǔ)配對(duì)的tRNA分子，進(jìn)而合成正確的肽鏈，實(shí)現(xiàn)遺傳信息向蛋白質(zhì)分子的轉(zhuǎn)化。tRNA：把氨基酸搬運(yùn)到核糖體上...

外泌體（exosome），特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。其主要來(lái)源于細(xì)胞內(nèi)內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體，經(jīng)多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中?，F(xiàn)已證實(shí)可以分泌外泌體的細(xì)胞有：肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、瘤細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等。外泌體在免疫...