別的還有科學(xué)家發(fā)現(xiàn),斑馬魚的腦部神經(jīng)元較為簡(jiǎn)單和可猜測(cè)。這些研究成果證明了斑馬魚合適用作形式動(dòng)物?,F(xiàn)在咱們已經(jīng)知道,斑馬魚的基因與人類基因的相似度到達(dá)87%,這意味著在其身上做藥物試驗(yàn)所得到的結(jié)果在大都情況下也適用于人體。此外,雌性斑馬魚可產(chǎn)卵200枚,胚胎在24小時(shí)內(nèi)就可發(fā)育成形,這使得生物學(xué)家能夠在同一代魚身上進(jìn)行不同的試驗(yàn),進(jìn)而研究病理演化過(guò)程并找到病因。正是通過(guò)在斑馬魚身上進(jìn)行的試驗(yàn),生物學(xué)家發(fā)現(xiàn),包含人類在內(nèi)的一些脊椎動(dòng)物之所以產(chǎn)下奇異的雙頭幼仔是因?yàn)閮煞N基因活動(dòng)紊亂形成的。斑馬魚實(shí)驗(yàn)遵循 3R 原則,優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)減少動(dòng)物使用數(shù)量。重慶斑馬魚實(shí)驗(yàn)用途
斑馬魚胚胎的透明性與體外受精特性,使其成為發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域的“活的人體顯微鏡”。德國(guó)馬普研究所團(tuán)隊(duì)通過(guò)單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),繪制出斑馬魚胚胎從受精卵到原腸胚期的細(xì)胞命運(yùn)圖譜,揭示了中胚層細(xì)胞在背腹軸形成中的動(dòng)態(tài)遷移規(guī)律。研究顯示,特定轉(zhuǎn)錄因子(如Tbx16)通過(guò)調(diào)控細(xì)胞黏附分子表達(dá),引導(dǎo)中胚層前體細(xì)胞向預(yù)定區(qū)域聚集,該機(jī)制與小鼠胚胎發(fā)育具有保守性,但斑馬魚胚胎因缺乏胎盤屏障,其細(xì)胞遷移速度較哺乳動(dòng)物快到3-5倍。在基因編輯技術(shù)賦能下,斑馬魚成為研究organ發(fā)生的理想模型。哈佛大學(xué)團(tuán)隊(duì)利用CRISPR-Cas9技術(shù),在斑馬魚胚胎中同時(shí)敲除多個(gè)心臟發(fā)育相關(guān)基因(如gata4、nkx2.5),發(fā)現(xiàn)其心臟原基在原腸運(yùn)動(dòng)階段即出現(xiàn)融合缺陷,較傳統(tǒng)小鼠模型提前48小時(shí)暴露表型。更突破性的是,通過(guò)光遺傳學(xué)工具調(diào)控特定神經(jīng)嵴細(xì)胞活性,可實(shí)時(shí)觀察心臟瓣膜發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞命運(yùn)的可塑性,揭示了心臟畸形中“基因-細(xì)胞-組織”的多級(jí)調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。這些發(fā)現(xiàn)為先天性心臟病早期干預(yù)提供了新的分子靶點(diǎn)。福建斑馬魚實(shí)驗(yàn)基因突變斑馬魚為何適用于科研?
當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損害因子誘發(fā)細(xì)胞DNA鏈斷裂時(shí),其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細(xì)胞裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴(kuò)散到細(xì)胞裂解液中,而核DNA因?yàn)榉肿恿刻笾荒芰粼谠弧T谥行詶l件下,DNA可進(jìn)入凝膠發(fā)生搬遷,而在堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,損害的DNA斷鏈及片段被釋放出來(lái)。因?yàn)檫@些DNA的分子量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過(guò)程中帶負(fù)電荷的DNA會(huì)離開核DNA向正極搬遷構(gòu)成“彗星”狀圖像,而未受損害的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重,發(fā)生的斷鏈和斷片越多,長(zhǎng)度也越小,在相同的電泳條件下搬遷的DNA量就愈多,搬遷的距離就愈長(zhǎng)。通過(guò)測(cè)定DNA搬遷部分的光密度或搬遷長(zhǎng)度就可以測(cè)定單個(gè)細(xì)胞DNA損害程度,然后確認(rèn)受試物的作用劑量與DNA損害效應(yīng)的聯(lián)系。彗星試驗(yàn)檢測(cè)低濃度基因毒物具有高靈敏性,研究的細(xì)胞不需處于有絲分裂期。一起,這種技術(shù)只需要少數(shù)細(xì)胞。
斑馬魚體長(zhǎng)只有3厘米,1升水里可以包容上百條、養(yǎng)殖起來(lái)很簡(jiǎn)單。此外,斑馬魚很簡(jiǎn)單鑒別男女并且它的胚胎是透明的,人們可以清楚地看到它的內(nèi)臟、血管和神經(jīng)的發(fā)育變化。正是因?yàn)檫@些特色,斑馬魚引起了美國(guó)俄勒岡大學(xué)聞名遺傳學(xué)家喬治博士的留意,這位熱帶魚愛(ài)好者在20世紀(jì)70時(shí)代初開始研討斑馬魚的養(yǎng)殖辦法,觀察其胚胎發(fā)育進(jìn)程。經(jīng)過(guò)近十年的研討,喬治博士的研討組于1981年發(fā)表了一篇具有深刻影響的論文。在這篇論文中,他們介紹了斑馬魚的體外受精等許多新技術(shù),接著又介紹了斑馬魚的卵裂特色、不同時(shí)期胚胎中細(xì)胞的發(fā)育進(jìn)程等,并發(fā)現(xiàn)斑馬魚腦中的許多神經(jīng)元的擺放簡(jiǎn)單而有規(guī)矩。環(huán)境du素檢測(cè)用斑馬魚,因其敏感體質(zhì),遇污染迅速反應(yīng),直觀呈現(xiàn)水質(zhì)安全狀況。
斑馬魚CRISPR基因編輯技術(shù)服務(wù),含基因敲入品系制備、基因敲入品系制備、轉(zhuǎn)基因品系制備等。斑馬魚基因敲入品系制備服務(wù)簡(jiǎn)介:1.基因敲入(Knockin)非同源依賴的DNA修復(fù)技術(shù),在斑馬魚基因組定點(diǎn)插入外源DNA(熒光蛋白、PA等)。2.基因敲入技術(shù)特點(diǎn)2.1定點(diǎn)插入;2.2敲入效率較低。服務(wù)流程:根據(jù)客戶基因敲入要求進(jìn)行基因分析;cas9mRNA和多個(gè)gRNA靶點(diǎn)的設(shè)計(jì)及合成;高效gRNA靶點(diǎn)的篩選及效率驗(yàn)證;敲入載體設(shè)計(jì)及構(gòu)建;斑馬魚胚胎的顯微注射和敲入驗(yàn)證;F0代斑馬魚的可遺傳性篩選;雜合子F1代斑馬魚的基因型鑒定。環(huán)特生物優(yōu)勢(shì):國(guó)際前列的斑馬魚敲入技術(shù)以及上百例的成功經(jīng)驗(yàn);特有的高效篩選方法。光遺傳技術(shù)操控斑馬魚神經(jīng)元,研究神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)路徑。河北斑馬魚實(shí)驗(yàn)委托
熒光標(biāo)記斑馬魚,神經(jīng)發(fā)育實(shí)驗(yàn)中,神經(jīng)元活動(dòng)軌跡清晰可見(jiàn),為腦科學(xué)研究提供關(guān)鍵線索。重慶斑馬魚實(shí)驗(yàn)用途
在藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究方面,斑馬魚幼魚展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。其肝臟代謝酶(如CYP3A65)與人類CYP3A4同源性達(dá)76%,且腸道屏障功能尚未完全建立,使得藥物吸收、分布、代謝過(guò)程可視化。瑞士諾華公司通過(guò)LC-MS/MS技術(shù)檢測(cè)斑馬魚幼魚體內(nèi)藥物濃度,發(fā)現(xiàn)某新型kang生素的生物利用度較傳統(tǒng)模型預(yù)測(cè)值高18%,該差異源于斑馬魚腸道中特異性轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)差異。這一發(fā)現(xiàn)促使藥物劑型設(shè)計(jì)優(yōu)化,使候選藥物在II期臨床試驗(yàn)中的療效提升30%。斑馬魚在中藥毒性研究中的應(yīng)用日益寬泛。中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院團(tuán)隊(duì)通過(guò)斑馬魚胚胎熱休克蛋白(Hsp70)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)熒光報(bào)告基因,構(gòu)建了中藥肝毒性的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)顯示,含馬兜鈴酸的中藥復(fù)方可使斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域熒光強(qiáng)度在24小時(shí)內(nèi)增加5倍,而傳統(tǒng)生化檢測(cè)需72小時(shí)才能達(dá)到相同靈敏度。該技術(shù)已應(yīng)用于中藥材質(zhì)量控制,成功識(shí)別出多批次含微量腎毒性成分的飲片,為中藥國(guó)際化提供了科學(xué)依據(jù)。重慶斑馬魚實(shí)驗(yàn)用途