熒光素(Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物發(fā)光的酶的統(tǒng)稱，其中*有代表性的是來自螢火蟲體內(nèi)(Fire?y)和海腎(Renilla)體內(nèi)的兩類螢光素酶，分別命名為F-Luciferase和R-Luciferase。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會(huì)發(fā)出生物熒光(bioluminescence)，可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光，常應(yīng)用于啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗(yàn)證等方向研究。熒光素酶的具體應(yīng)用，主要有以下兩個(gè)方面：(一)：pGL3-Basic---用于轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)與啟動(dòng)子活性分析。把待分析啟動(dòng)子區(qū)段構(gòu)建到F-Luciferase上游，和轉(zhuǎn)錄因子共轉(zhuǎn)染分析F-Luciferase活性即可反應(yīng)啟動(dòng)子的活性高低。該質(zhì)粒通常需要結(jié)合持續(xù)性表達(dá)R-Luciferase的載體作為內(nèi)參以校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。(二)：psiCHECK2---miRNA與其靶點(diǎn)相關(guān)分析,包括miRNA靶基因驗(yàn)證、lncRNA與circRNA吸附miRNA驗(yàn)證等。  需要把miRNA潛在結(jié)合靶點(diǎn)克隆到R-Luciferase (hRLuc) 3’UTR區(qū)域，然后與待測miRNA共同轉(zhuǎn)染細(xì)胞內(nèi)測定R-Luciferase活性高低，F(xiàn)-Luciferase (hLuc+)作為校正內(nèi)參校正不同樣品之間轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)染效率。MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。堿性磷酸酶

在正常免疫應(yīng)答過程中，人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 可以驅(qū)使白細(xì)胞定向遷移到受傷或gan染部位以保護(hù)機(jī)體防御外來致病物，但是在特定的環(huán)境中，免疫細(xì)胞也會(huì)因過度活化而攻擊正常組織，導(dǎo)致自身免疫性疾病。人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 (CTX)ELISA試劑盒 因此也和許多自身免疫性和過敏性等疾病相關(guān)聯(lián)，包括多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、動(dòng)脈硬化、哮chuan和移植排斥等。

如甲狀腺,鹽水可提取核抗原抗體(ENA),抗核抗體,DNA,抗心磷脂抗體,類風(fēng)濕因子,循環(huán)免疫復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞抗體,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰瘡,蛋白酶,短膜蟲法,肝-腎,肝-腎-胃,肌內(nèi)膜抗體,角蛋白抗體,抗核抗體,抗核糖體蛋白抗體,抗聚角蛋白微絲蛋白抗體,抗鏈O,抗卵巢抗體,抗平滑肌抗體,抗線粒體抗體,抗心肌抗體,抗組蛋白抗體,粒細(xì)胞彈性蛋白酶,皮膚抗體,腎上腺抗體,腎小球基底膜,腎小球基底膜抗體,髓過氧化物酶,條紋肌抗體,網(wǎng)硬蛋白抗體,胃壁細(xì)胞抗體,胃蛋白酶,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,細(xì)菌性滲透性增強(qiáng)因子等。 免疫學(xué)ELISA試劑盒FACS可以用于分離表達(dá)GFP的細(xì)胞和不表達(dá)GFP的細(xì)胞。

細(xì)胞毒性是由合成化合物、細(xì)胞自然產(chǎn)生毒性或免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞(如細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞,自然殺傷細(xì)胞等)引起的細(xì)胞殺傷事件。目前主要通過對(duì)受損細(xì)胞釋放的相關(guān)底物(如乳酸脫氫酶-LDH)進(jìn)行定量,從而判斷細(xì)胞膜的受損情況。本期，將為大家講解有關(guān)細(xì)胞毒性的檢測產(chǎn)品、原理及特點(diǎn)等內(nèi)容。

細(xì)胞增殖及毒性檢測是生物相容性測試的一種，檢測藥物或者新型材料在生物環(huán)境中的毒性情況，即通過檢測材料或者藥物對(duì)細(xì)胞的增殖或者生長的影響，來評(píng)價(jià)藥物或材料的毒性或者活性，主要用于藥物活性篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、抗**藥效測定等；常用MTT法或者CCK-8法檢測，另外也可以通過Live/dead雙染法進(jìn)行細(xì)胞成像，更直觀的記錄細(xì)胞的存活情況。

細(xì)胞增殖是通過細(xì)胞分裂引起的細(xì)胞數(shù)量增加，在整個(gè)生命周期中對(duì)正常組織發(fā)育和維持是必須的。一些類型的細(xì)胞會(huì)處于持續(xù)增殖狀態(tài)，如皮膚和骨髓細(xì)胞，但許多成人組織中的細(xì)胞會(huì)處于非增殖狀態(tài)，只有在損傷或感ran時(shí)，才能被激huo來補(bǔ)充細(xì)胞。與之相反，細(xì)胞周期關(guān)鍵基因突變引起的細(xì)胞增殖失調(diào)是各類cancer的標(biāo)志，會(huì)造成**異常的不受控制的生長。增殖檢測一般用于分析分裂中的細(xì)胞數(shù)量的變化，進(jìn)而反應(yīng)細(xì)胞的生長狀態(tài)及活性，細(xì)胞增殖檢測是細(xì)胞分析和藥物研發(fā)中經(jīng)常會(huì)使用的手段。目前廣泛應(yīng)用于**生物學(xué)，分子生物學(xué)，藥代動(dòng)力學(xué)等領(lǐng)域。慢病毒攜帶的基因組可整合到宿主基因組，使宿主細(xì)胞長時(shí)間穩(wěn)定表達(dá)外源基因。

慢病毒載體（Lentiviralvector）較逆轉(zhuǎn)錄病毒載體有更廣的宿主范圍，慢病毒能夠有效感ran非周期性和有絲分裂后的細(xì)胞。慢病毒載體能夠產(chǎn)生表達(dá)shRNA的高滴度的慢病毒，在周期性和非周期性細(xì)胞、干細(xì)胞、受精卵以及分化的后代細(xì)胞中表達(dá)shRNA，實(shí)現(xiàn)在多種類型的細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因小鼠中特異而穩(wěn)定的基因表達(dá)的功能性沉默，為在原代的人和動(dòng)物細(xì)胞組織中快速而高效地研究基因功能，以及產(chǎn)生特定基因表達(dá)降低的動(dòng)物提供了可能性。慢病毒作為siRNA的攜帶者，不但具備特異性地使基因表達(dá)沉默的能力，而且充分發(fā)揮了慢病毒載體自身所具備的優(yōu)勢，為基因功能的研究提供了更強(qiáng)有力的工具。慢病毒載體可以將外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色體上，從而達(dá)到持久性表達(dá)目的序列的效果。對(duì)于一些較難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞，如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞等，使用慢病毒載體，能大da提高目的基因或目的shRNA的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，且目的基因或目的shRNA整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大da增加，能夠比較方便快捷地實(shí)現(xiàn)目的基因或目的shRNA的長期、穩(wěn)定表達(dá)。研究者可以利用光來檢測、測量和控制分子信號(hào)、細(xì)胞和細(xì)胞群，以便了解它們的活動(dòng)。Human MYLK-MYLKP1 Pseudogene Transcription Analysis qPCR Kit

GFP可以標(biāo)記轉(zhuǎn)基因修飾的ES細(xì)胞，然后可以將其用于轉(zhuǎn)入小鼠并產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因小鼠。堿性磷酸酶

就eGFP而言，相對(duì)于GFP，其熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。mCherry是從DsRed演化來的性能*好的一個(gè)單體紅色熒光蛋白，可以和GFP系列熒光蛋白共用，實(shí)現(xiàn)多色標(biāo)記。熒光蛋白活性和被融合的目標(biāo)蛋白功能相互沒有明顯影響。這些熒光標(biāo)簽蛋白，其融合表達(dá)目的蛋白后具有以下優(yōu)點(diǎn)：1.不用破碎組織細(xì)胞和不加任何底物，直接通過熒光顯微鏡就能在活細(xì)胞中發(fā)出綠色熒光，實(shí)時(shí)顯示目的基因的表達(dá)情況，而且熒光性質(zhì)穩(wěn)定，被譽(yù)為活細(xì)胞探針。2.其自發(fā)熒光，不需用目的基因的抗體或原位雜交技術(shù)就可推知目的基因在細(xì)胞中的定位等情況。3.同時(shí)細(xì)胞內(nèi)的其它產(chǎn)物不會(huì)干擾標(biāo)簽蛋白檢測，從而使其檢測更顯得快速、簡便、靈敏度高而且重現(xiàn)性。4.其低消耗、高靈敏度檢測，十分適用于高通量的藥物篩選。因此現(xiàn)eGFP表達(dá)標(biāo)簽被廣fan地應(yīng)用于基團(tuán)表達(dá)調(diào)控、轉(zhuǎn)基因功能研究、蛋白在細(xì)胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等方面。5.mCherry紅色熒光蛋白在標(biāo)記病毒顆粒，研究病毒和宿主細(xì)胞之間更有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢。如用mRFP或mCherry標(biāo)記HIV病毒顆粒，研究HIV和宿主細(xì)胞問的相互作用以及HIV侵染宿主細(xì)胞的過程．用mRFP標(biāo)記慢病毒顆粒，研究慢病毒在小鼠體內(nèi)的復(fù)制過程等。堿性磷酸酶

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1、原代細(xì)胞：ScienCell（中國區(qū)正規(guī)一級(jí)代理）人源和動(dòng)物源各種原代細(xì)胞。

2、培養(yǎng)基：原代細(xì)胞**低血清、無血清、無異源蛋白無動(dòng)物成分培養(yǎng)基。

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