dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM):助力分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高效防污染解決方案在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增和檢測(cè)的工具之一。然而,PCR產(chǎn)物的殘留污染可能導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果,嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)作為一種高效的防污染試劑,通過(guò)與尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)聯(lián)合使用,能夠有效解決這一問(wèn)題。產(chǎn)品特點(diǎn)高純度與穩(wěn)定性dNTP/dUTPMixture(2.5mMeach/5mM)采用高純度的dATP、dCTP、dGTP和dUTP,純度≥99%,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。該產(chǎn)品在-20℃下可穩(wěn)定保存24個(gè)月,使用時(shí)需避免反復(fù)凍融。防污染機(jī)制該產(chǎn)品通過(guò)在PCR反應(yīng)中用dUTP替代dTTP,使擴(kuò)增產(chǎn)物中摻入dU堿基。隨后,UDG酶能夠特異性地降解含有dU的DNA產(chǎn)物,從而有效去除殘留的PCR產(chǎn)物污染。這種防污染系統(tǒng)特別適用于高通量PCR實(shí)驗(yàn)和需要嚴(yán)格控制假陽(yáng)性的應(yīng)用場(chǎng)景。兼容性與適用性dNTP/dUTPMixture適用于多種DNA聚合酶,如Taq酶和BstDNA聚合酶等,可用于PCR、real-timePCR、RT-PCR、引物延伸反應(yīng)以及cDNA合成等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。然而,需要注意的是,某些具有校正活性的酶可能不適用于該混合物,具體需參考酶的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。盡管Ultra-Long Master Mix設(shè)計(jì)用于長(zhǎng)片段擴(kuò)增,但在某些情況下,可能出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增,需要通過(guò)優(yōu)化引物。核糖核酸酶T1
在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 則是實(shí)現(xiàn)高保真擴(kuò)增的理想選擇。這種預(yù)混液結(jié)合了Pfu DNA聚合酶的高保真特性和優(yōu)化的反應(yīng)體系,為科研人員提供了一個(gè)效率、便捷且可靠的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及必要的輔助成分。Pfu DNA聚合酶以其保真性而聞名,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過(guò)程中糾正錯(cuò)誤摻入的堿基,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與Taq DNA聚合酶相比,Pfu酶的錯(cuò)誤率更低,使其成為需要精確擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)(如基因克隆、突變分析和測(cè)序準(zhǔn)備)的優(yōu)先工具。此外,Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的無(wú)染料配方為實(shí)驗(yàn)提供了更大的靈活性。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)具體需求選擇后續(xù)的檢測(cè)方法,例如凝膠電泳分析、平末端克隆或測(cè)序,而無(wú)需擔(dān)心染料對(duì)結(jié)果的干擾。這種無(wú)染料設(shè)計(jì)特別適合需要進(jìn)一步處理的PCR產(chǎn)物,例如用于構(gòu)建重組質(zhì)?;蜻M(jìn)行下游功能分析。Pfu Master Mix (2×) (Without Dye) 的2倍濃度設(shè)計(jì)進(jìn)一步簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動(dòng)配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。Recombinant Human FGF-21Endo H,糖苷內(nèi)切酶 H 具有高度特異性的催化活性,它能夠特異性地水解 N - 連接寡糖鏈中兩個(gè)糖苷鍵。
產(chǎn)品特點(diǎn)50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸,其濃度為25 μM,以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強(qiáng)度在PCR過(guò)程中保持穩(wěn)定,不會(huì)因擴(kuò)增反應(yīng)而發(fā)生變化,因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號(hào)。其激發(fā)波長(zhǎng)為575 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為602 nm,與多數(shù)qPCR儀器的光學(xué)系統(tǒng)兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能夠在-20℃避光保存長(zhǎng)達(dá)2年,短期使用時(shí)可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實(shí)驗(yàn)中能夠提供一致的熒光信號(hào),減少因試劑變質(zhì)導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差。性能優(yōu)勢(shì)校正孔間誤差:qPCR實(shí)驗(yàn)中,由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素,不同孔之間的熒光信號(hào)可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過(guò)校正這些非PCR相關(guān)的變化,顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性:通過(guò)使用ROX染料對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理,實(shí)驗(yàn)人員可以在較少的重復(fù)實(shí)驗(yàn)中獲得更精確的結(jié)果,從而節(jié)省時(shí)間和資源。適用于多種儀器:50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器,如ABI 5700、7000、
在分子生物學(xué)研究中,核酸染料是檢測(cè)DNA和RNA的重要工具。然而,傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB)染料因其劇毒性和致病,逐漸被更安全的替代品所取代。GoldenView 吖啶橙核酸染料作為一種新型的核酸染料,憑借其性能和安全性,成為科研工作者的理想選擇。GoldenView 吖啶橙核酸染料的成分是吖啶橙,這是一種細(xì)胞滲透性熒光染料,能夠與核酸結(jié)合并發(fā)出熒光信號(hào)。其獨(dú)特的熒光特性使其在檢測(cè)雙鏈DNA(dsDNA)時(shí)呈現(xiàn)綠色熒光(530 nm),而在與單鏈DNA(ssDNA)或RNA結(jié)合時(shí)則發(fā)出紅色熒光(640 nm)。這種雙重?zé)晒馓匦圆粌H提高了檢測(cè)的靈敏度,還為研究人員提供了更豐富的信息。在瓊脂糖凝膠電泳中,GoldenView 吖啶橙核酸染料表現(xiàn)出與EB相當(dāng)?shù)撵`敏度,能夠清晰地檢測(cè)到大片段(>1 kb)的DNA。此外,該染料的使用方法與EB完全相同,無(wú)需改變現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)流程,即可輕松替換傳統(tǒng)染料。安全性是GoldenView 吖啶橙核酸染料的另一大優(yōu)勢(shì)。與EB不同,GoldenView 經(jīng)過(guò)多項(xiàng)致突變性試驗(yàn)驗(yàn)證,結(jié)果均為陰性,表明其對(duì)細(xì)胞和環(huán)境更為安全。這種低毒性特性使其在實(shí)驗(yàn)室中使用更為便捷,同時(shí)降低了對(duì)研究人員健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)。這種預(yù)混液的高效性和穩(wěn)定性使其在基因擴(kuò)增、基因檢測(cè)、疾病診斷和法醫(yī)鑒定等領(lǐng)域具有廣的應(yīng)用價(jià)值。
Hot-Start Taq DNA Polymerase:助力高特異性PCR擴(kuò)增在分子生物學(xué)研究中,PCR技術(shù)是不可或缺的工具,而Taq DNA聚合酶作為PCR反應(yīng)的酶,其性能直接影響擴(kuò)增結(jié)果的準(zhǔn)確性和效率。近年來(lái),Hot-Start Taq DNA Polymerase憑借其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)Hot-Start Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)過(guò)特殊處理的Taq DNA聚合酶,通過(guò)化學(xué)修飾或結(jié)合溫度敏感的抑制劑,能夠在低溫條件下抑制酶的活性,從而避免非特異性擴(kuò)增的發(fā)生。這種設(shè)計(jì)使得反應(yīng)體系在室溫下組裝時(shí),引物不會(huì)因非特異性結(jié)合而導(dǎo)致錯(cuò)誤擴(kuò)增,顯著提高了PCR反應(yīng)的特異性和靈敏度。其主要特點(diǎn)包括:高特異性:通過(guò)抑制低溫下的酶活性,有效避免引物二聚體和非特異性結(jié)合,從而提高擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性。高靈敏度:即使在低拷貝數(shù)的模板中,也能高效擴(kuò)增目標(biāo)片段。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需額外的高溫步驟,反應(yīng)體系可在室溫下直接組裝。兼容性強(qiáng):適用于多種復(fù)雜的模板,如富含AT的DNA和經(jīng)過(guò)亞硫酸氫鹽轉(zhuǎn)化的DNA。
與Taq DNA Polymerase不同,Pfu DNA Polymerase產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無(wú)3'端"A"突出。核糖核酸酶T1
AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型2×預(yù)混液,專(zhuān)為快速、有效的PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)。該預(yù)混液包含Hieff Canace® AdvanceFast High-Fidelity DNA Polymerase、dNTPs、優(yōu)化的緩沖體系以及電泳指示染料,能夠明顯提高PCR反應(yīng)的速度和特異性。產(chǎn)品特點(diǎn)該預(yù)混液的重要優(yōu)勢(shì)在于其快速擴(kuò)增能力,擴(kuò)增速度可達(dá)15秒/kb,甚至在1 kb以?xún)?nèi)的片段中,極限速度可達(dá)5秒/kb。此外,預(yù)混液中的高保真DNA聚合酶具有3'-5'外切酶活性,能夠有效降低錯(cuò)誤率,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。其優(yōu)化的緩沖體系和延伸因子使其能夠擴(kuò)增長(zhǎng)達(dá)13 kb的片段,適用于復(fù)雜模板的擴(kuò)增。預(yù)混液中還添加了電泳指示染料,PCR產(chǎn)物可直接進(jìn)行電泳,無(wú)需額外添加上樣緩沖液。此外,該產(chǎn)品含有特異保護(hù)劑,即使經(jīng)過(guò)反復(fù)凍融,仍能保持穩(wěn)定的活性。應(yīng)用場(chǎng)景AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 廣應(yīng)用于常規(guī)PCR、基因克隆、復(fù)雜模板擴(kuò)增以及高通量建庫(kù)等場(chǎng)景。其快速擴(kuò)增能力和高特異性使其特別適合大規(guī)?;驒z測(cè)、菌落PCR以及微量DNA的檢測(cè)。總之,AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye) 憑借其快速擴(kuò)增、高特異性和便捷性,為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)提供了高效的解決方案,尤其適合需要快速結(jié)果和高通量操作的場(chǎng)景。核糖核酸酶T1